سایت دانشجو سرا

بررسی اثر زعفران بر روی مبتلایان به لوسمی و نقص تمایلات جنسی و پاسخ‌های بیوشیمیایی و بیومولکولی مربوطه در مردان و زنان ایرانی

 

  

توجه داشته باشید: درصورتی که شما صاحب اثر این فایل می باشید یا به هر دلیلی نسبت به فایل تحقیقاتی مذکور در این پست مالکیت معنوی دارید و درخواست حذف آن را دارید، در واتس آپ به شماره 09100636002 پیام دهید تا ظرف 24 ساعت نسبت به حذف فایل از روی سایت دانشجوسرا اقدام شود. در صورت تمایل و درخواست، دو مقاله به صورت رایگان (به نام پژوهشگر و دانشجو) در مجلات علمی معتبر پذیرش شده و چاپ می گردد. ((حفظ حقوق معنوی صاحب اثر در اولویت فعالیت سایت دانشجوسرا می باشد))

 

 

چکیده

مقدمه: تقاضا برای داروهای گیاهی با بیشترین اثربخشی و کمترین سمیت منجر به مطالعه بر روی عوامل محافظت کننده مشهور در میوه ها و سبزیجات شده است. زعفران از جمله گیاهانی است که سرشار از کاروتنوئیدها می باشد و در مناطق مختلف جهان عموما مصرف می شود و مطالعاتی که تا کنون انجام شده، اثرات ضد سرطانی زعفران و همچنین اثرات آن را در تقویت کنندگی رفتارهای جنسی در مدلهای حیوانی نشان داده اند. تحقیق حاضر به منظور بررسی اثر زعفران بر روی لوسمی در سطح مولکولی و بررسی آن در بهبود نیروی جنسی در انسان صورت گرفته است.

روش کار: در بررسی اثر زعفران بر روی لوسمی، نمونه گیری از خون 7 نفر زن و مرد مبتلا به سرطان خون قبل از شروع هر گونه درمانی انجام شدو میزان ازدیاد آنکوژن int-2 (کد کننده فاکتور رشد فیبروبلاست (FGF-3) بر روی کروموزوم 11q13) در سطح همانندسازی DNA و رونویسی RNA بررسی شد. پس از استخراج DNA و RNA از سلولهای خونی و پس از کشت نمونه خون افراد مبتلا به سرطان خون و استخراج RNA و تهیه C-DNA، با کمک تکنیک Differential Quantitative Polymerase Chain Reaction(dqPCR) ترادفی از ژن int-2 همزمان با ترادفی از ژن کنترل تک نسخه ای اینترفرون-گاما (γ-IFN) تکثیر شد پس از الکتروفورز محصولات PCR داده های بدست آمده از دستگاه مستندساز ژل (Gel Doc. System) توسط نرم افزار UVitec آنالیز شد. برای بررسی اثر زعفران در تغییر تعداد و توده های سلولهای لنفوسیتی پس از کشت سلولهای خونی لام تهیه شد و نتایج مقایسه گردید. در بررسی اثر زعفران در بهبود نیروی جنسی از 9 مرد و زن مبتلا به بی میلی جنسی قبل از مصرف زعفران آزمایشات هورمونی و اسپرموگرام انجام شد و پس از مصرف کپسولهای حاوی 25 میلی گرم زعفران دو بار در روز به مدت یکماه، مجددا آزمایشات هورمونی و اسپرموگرام تکرار و نتایج مقایسه شد.

یافته ها: ازدیاد ژن int-2 در سطح همانندسازی DNA در 4 نمونه سرطانی مشاهده شد که نسبت به DNA افراد شاهد 45/1 برابر افزایش نشان می داد. تزاید درسطح رونویسی ژن هدف در شرایط بدون زعفران 56/5 محاسبه شد که در شرایط مجاورت با زعفران به 83/3 رسید که 45/1 برابر کاهش نشان می داد. شدت BIR-نسبت شدت باند آنکوژن به ژن مرجع- در نمونه های سرطانی در سطح همانندسازی 45/5 بدست آمد و همان نسبت در سطح رونویسی 37/5 محاسبه شد که نسبت به افراد کنترل افزایش نشان می داد. تعداد لنفوسیتها در نمونه های سرطانی در مقایسه با هم پس از تاثیر عصاره زعفران به میزان سه برابر و تعداد توده های لنفوسیتی حدودا دو برابر کاهش یافت. میانگین غلظت هورمون FSH، LH، استروژن و پرولاکتین پس از مصرف زعفران افزایش و تستوسترون و پروژسترون کاهش نشان داد. در بررسی فاکتورهای اسپرمی حجم مایع منی، تعداد اسپرم و تحرک اسپرم و درصد اسپرمهای طبیعی پس از مصرف زعفران افزایش یافت.

بحث و نتیجه گیری: نتایج نشان می دهند که ازدیاد آنکوژن int-2 در بیماران مبتلا به لوسمی همانند سرطان تخمدان و پستان نیز می تواند اتفاق بیفتد که با وجود دخالت این فاکتور در مکانیسمهای مختلف رشد و نمو و تکثیر سلول خصوصا در پدیده آنژیوژنز( رگ زایی) می تواند به پیشرفت و وخامت بیماری کمک نماید. با توجه به اینکه در این تحقیق تشدید ژنی هم در دز ژنی و هم در سطح نسخه برداری برای int-2 مشاهده شد و با تاثیر زعفران میزان این تشدید و تزاید زنی کاهش یافت این مطالعه می تواند به عنوان اولین بررسی مولکولی تاثیر زعفران در کاهش تشدید ژنی int-2 لحاظ شود و با مشاهدات حاضر تاثیر زعفران در کند نمودن روند تشدید ژنی در افراد مبتلا به لوسمی تایید می شود، همچنین با کاهش روند تقسیم سلولی، زعفران توانسته است از تراکم سلولی کاسته و از تجمیع و به هم چسبیدن آنها جلوگیری بعمل آورد که با این وجود می تواند نقشی در ممانعت از چسبیدن سلولهای سرطانی به یکدیگر و یا سایر سلولها و در نتیجه کند کردن روند متاستاز ایفا نماید. هرچند نقش زعفران در برقراری تعادل هورمونی بدن نیاز به مطالعات بیشتری دارد ولی با اثر گذاشتن بر روی بعضی از ژنها در بیان صفات دخیل در میل جنسی می تواند در بهبود عملکرد سیستم جنسی و افزایش قوای جنسیی نقش داشته باشد، ضمن اینکه به عنوان ماده ای فرح بخش می تواند با تاثیر روی خلق و خوی افراد به عنوان یک عامل ثانویه در تقویت بروز رفتارهای هنجار جنسی نیز عمل نماید. زعفران به عنوان یک گیاه درمانی با داشتن خواص آنتی اکسیدانی و کنترل کننده تقسیم سسلولی می تواند در بهبود روند اسپرماتوژنز و تقویت پارامترهای اسپرمی نیز عمل نماید.

واژگان کلیدی : زعفران، سرطان خون، قوای جنسی،آنکوژن، ازدیاد ژنی، بیان ژن ،int-2،RT-PCR ،dqPCR

 

عنوان صفحه

فصل اول

کلیات-------------------------------------------------- 2

1-1- نیاز جنسی------------------------------------------ 2

1-2- شیوع اختلالات جنسی--------------------------------- 3

1-3- تعریف تمایل جنسی----------------------------------- 3

1-3-1- فیزیولوژی میل جنسی-------------------------------- 5

1-4- هورمونهایی تنطیم کننده رفتار و عملکرد جنسی---------------- 5

1-4-1- مکانیسمهای تنطیمی--------------------------------- 6

1-4-2- هورمونها و رفتارهای جنسی---------------------------- 7

1-5- سیکل پاسخ جنسی------------------------------------ 8

1-5-1- برانگیختگی-------------------------------------- 9

1-5-2- لذت یا طول فعالیت جنسی---------------------------- 9

1-5-3- ارضاء------------------------------------------- 9

1-5-4- بازگشت----------------------------------------- 10

1-6- اختلالات میل جنسی---------------------------------- 10

1-6-1- بیماریها و داروهایی که باعث افت میل جنسی می شوند--------- 11

1-7- تاریخچه مصرف مواد طبیعی تحریک کننده میل جنسی----------- 11

1-8- سرطان-------------------------------------------- 12

1-9- سرطان به روایت آمار---------------------------------- 13

1-10- انواع سرطان---------------------------------------- 14

عنوان صفحه

1-11- تاریخچه سرطان------------------------------------- 14

1-12- هفت علامت آگاه کننده سرطان-------------------------- 15

1-13- مراحل پیدایش سرطان-------------------------------- 15

1-14- نقش آنتی اکسیدانتها در پیشگیری و پیشرفت سرطان----------- 16

1-15- عوامل ایجاد سرطان---------------------------------- 18

1-15-1- انرژی تشعشعی----------------------------------- 18

1-15-2- ترکیبات شیمیایی---------------------------------- 19

1-16- خصوصیات سلولهای سرطانی--------------------------- 19

1-17- ژنهای موثر در پیدایش سرطان--------------------------- 20

1-17-1- ژنهای محافظ------------------------------------- 20

1-17-2- ژنهای سرکوبگر تومور------------------------------- 21

1-17-3- آنکوژن ها--------------------------------------- 21

1-17-3-1- مکانیسم های ایجاد آنکوژنها از پروتوآنکوژنها------------ 23

1-17-3-2- مکانیسم اثر آنکوژن ها---------------------------- 23

1-18- فاکتورهای رشد فیبروبلاست---------------------------- 25

1-19- پروتو آنکوژن C-myc-------------------------------- 26

1-20- سایتوکین ها---------------------------------------- 27

1-20-1- اینترفرون ها-------------------------------------- 28

1-20-2- اینترفرون ایمن------------------------------------ 29

1-21- سرطان خون--------------------------------------- 29

عنوان صفحه

1-22- سلولهای خونی-------------------------------------- 30

1-22-1- لکوسیتها---------------------------------------- 30

1-22-2 اریتروسیتها--------------------------------------- 30

1-22-3- پلاکتها------------------------------------------ 31

1-23- شیوع سرطان خون----------------------------------- 32

1-24- عوامل خطر در سرطان خون---------------------------- 32

1-25- روش های تشخیص سرطان خون------------------------- 32

1-26- روش های درمان سرطان خون--------------------------- 33

1-27- طبقه بندی لوسمی ها---------------------------------- 34

1-27-1- لوسمی های حاد----------------------------------- 34

1-27-1-1- لوسمی لنفوبلاستیک حاد-------------------------- 34

1-27-1-2- لوسمی میلوئید حاد------------------------------- 35

1-27-2- لوسمی های مزمن---------------------------------- 35

1-27-2-1- لوسمی لنفوبلاستیک مزمن-------------------------- 35

1-27-2-2- لوسمی میلوئید مزمن----------------------------- 36

1-28- خونسازی----------------------------------------- 36

1-29- زعفران ------------------------------------------- 36

1-29-1- تاریخچه زعفران----------------------------------- 36

1-29-2- اختصاصات گیاه شناسی----------------------------- 38

1-29-2-1- رده بندی-------------------------------------- 38

عنوان صفحه

1-29-2-1-1- مشخصات تیره زنبقیان-------------------------- 38

1-29-2-1-2- مشخصات جنس Crocus L.--------------------- 39

1-29-2-1-3- مشخصات گونه Sativus------------------------ 39

1-29-3- ترکیبات شیمیایی زعفران----------------------------- 40

1-29-3-1- ترکیبات عمومی زعفران--------------------------- 40

1-29-3-2- ترکیبات رنگی زعفران----------------------------- 41

1-29-3-3- ترکیبات عامل طعم در زعفران----------------------- 41

1-28-3-4- ترکیبات عامل عطر و بو---------------------------- 41

1-29-4- اسامی مختلف زعفران------------------------------- 42

1-28-5- انواع زعفران------------------------------------- 43

1-29-6- انتشار جغرافیایی زعفران----------------------------- 43

1-29-6-1- خاستگاه زعفران مزروعی-------------------------- 43

1-29-7- خواص و مصارف زعفران---------------------------- 45

1-29-7-1- مصرف غذایی زعفران----------------------------- 45

1-29-7-2- کاربردهای سنی رایج از گیاه زعفران------------------- 45

1-29-7-3- خواص دارویی زعفران از نظر فروشندگان گیاهان دارویی---- 46

1-29-7-4- خواص و کاربردهای دارویی ترکیبات زعفران------------- 46

1-29-8- تاریخجه اثرات ضد سرطانی زعفران--------------------- 47

1-29-9- مکانیسمهای پیشنهادی ضد سرطانی زعفران---------------- 48

1-29-9-1- ویژگیهای ضد سرطانی زعفران در محیط برون تنی--------- 49

عنوان صفحه

1-29-9-2- ویژگیهای ضد سرطانی زعفران در محیط درون تنی--------- 50

1-29-10- سمیت زعفران----------------------------------- 51

1-29-11- مروری بر اثرات زعفران بر لوسمی--------------------- 51

1-29-12- مروری بر اثرات زعفران به عنوان محرک جنسی----------- 52

فصل دوم

مواد وروشها--------------------------------------------- 56

2-1- مواد و محلولهای لازم---------------------------------- 56

2-2- روشها--------------------------------------------- 60

2-2-1- انتخاب نمونه های با کم میلی یا بی میلی جنسی-------------- 60

2-2-3- آماده سازی کپسول زعفران---------------------------- 60

2-2-4- نحوه مصرف و بررسی تاثیر زعفران در افراد دچار کم میلی جنسی- 60

2-2-5- تهیه نمونه بیماران سرطانی----------------------------- 61

2-2-6- نحوه مصرف زعفران در افراد سالم و سرطانی--------------- 61

2-2-7- روش تهیه عصاره زعفران 1 درصد----------------------- 61

2-2-8- جداسازی سلولهای لنفوسیت از خون محیطی---------------- 62

2-2-9- استخراج کامل DNA از خون محیطی-------------------- 62

2-2-10- طرز تهیه محیط کشت------------------------------- 64

2-2-10-1- روش کشت سلولهای لنفوسیت----------------------- 64

2-2-10-2- روش برداشت سلولهای لنفوسیت کشت داده شده و تهیه

لام برای شمارش سلولی------------------------------------ 64

عنوان صفحه

2-2-10-3- رنگ آمیزی لام با رنگ گیمسا----------------------- 65

2-2-10-4- شمارش تعداد لنفوسیت ها و توده های سلولی

لامها با میکروسکوپ--------------------------------------- 65

2-2-10-5- جداسازی سلولهای لنفوسیت از سلولهای کشت داده شده----- 65

2-2-11- تخلیص و جداسازی RNA کل از سلولهای سالم و

سلولهای سرطانی کشت داده شده------------------------------ 66

2-2-11-1- استخراج RNA ژنومی---------------------------- 66

2-2-11-1-1- اجزای کیت---------------------------------- 67

2-2-11-1-2- مراحل انجام کار------------------------------- 67

2-2-12- روش RT-PCR---------------------------------- 68

2-2-12-1- روش ساخت C-DNA به روش رونوشت برداری معکوس-- 68

2-2-12-1-1- اجزای سازنده کیت برای انجام واکنش

رونوشت برداری معکوس------------------------------------ 69

2-2-12-1-2- مراحل انجام کار------------------------------- 69

2-2-12-2- انجام PCR بر روی C-DNA حاصل

از واکنش RT و DNA--------------------------------------------------- 70

2-2-13- تکنیک PCR--------------------------------------------------- 70

2-2-13-1- مالتیپلکس PCR-------------------------------- 71

2-2-13-2- روش عملی PCR------------------------------- 72

 

عنوان صفحه

2-2-14- الکتروفورز نمونه های تکثیر شده با PCR بر

روی ژل آگارز و مستندسازی ژل------------------------------- 75

2-2-15- مقایسه شدت باندها روی ژل آگارز---------------------- 76

فصل سوم

یافته ها------------------------------------------------- 78

3-1- روش بررسی---------------------------------------- 78

3-1-1- مبتلایان به کم میلی جنسی یا بی میلی جنسی---------------- 78

3-1-2- سرطان خون-------------------------------------- 81

3-1-2-1- بررسی ازدیاد آنکوژن int-2 و C-myc در

سطح همانندسازی DNA----------------------------------- 81

3-1-2-2- بررسی ازدیاد آنکوژن Int-2 در سطح رونویسی

RNA با تاثیر زعفران-------------------------------------- 83

3-1-2-3- بررسی تعداد وتوده های لنفوسیت بیماران سرطانی

با تاثیر زعفران------------------------------------------- 86

فصل چهارم

بحث-------------------------------------------------- 89

پیشنهادات---------------------------------------------- 94

منابع-------------------------------------------------- 96

پیوست االف- ترادف ژن Int-2 در انسان------------------------- 108

پیوست ب- ترادف ژن γ-IFN در انسان------------------------- 114

عنوان صفحه

پیوست ج- پرسشنامه افراد مبتلا به کم میلی یا بی میلی جنسی---------- 120

چکیده انگلیسی------------------------------------------- 127

فهرست جداول

جدول 1-1: بعضی از مواد شیمیایی سرطانزا----------------------- 19

جدول 1-2: ژنهای سرکوبگر تومور----------------------------- 21

جدول 1-3: آنکوژنها--------------------------------------- 22

جدول 1-4: طبقه بندی محصول آنکوژنها------------------------- 24

جدول 1-5: نام، زیستگاه طبیعی و زمان گلدهی گونه های

مختلف زعفران در ایران------------------------------------- 44

جدول 2-1: آغازگرهای طراحی شده مورد استفاده در واکنش PCR------ 58

جدول 2-2: مواد و مقادیر لازم برای واکنش PCR با

پرایمرهای Int-2 و –IFNγ -------------------------------- 72

جدول 2-3: مواد و مقادیر لازم برای واکنش PCR با

پرایمرهای C-mycE2 و –IFNγ---------------------------------- 73

جدول 2-4: مواد و مقادیر لازم برای واکنش PCR با

پرایمرهای C-mycE3 و –IFNγ---------------------------------- 73

جدول 2-5: برنامه PCR برای تکثیر بخشهایی از ژن Int-2

و –IFNγ در نمونه های سرطانی و سالم------------------------- 74

جدول 2-6: برنامه PCR برای تکثیر بخشهایی از ژن C-mycE2

و –IFNγ در نمونه های سرطانی و سالم------------------------- 74

فهرست جداول صفحه

جدول 2-7: برنامه PCR برای تکثیر بخشهایی از ژن C-mycE3

و –IFNγ در نمونه های سرطانی و سالم----------------------------------- 75

جدول 3-1 مشخصات افراد مبتلا به کم میلی یا بی میلی جنسی--------- 78

جدول 3-2 مشخصات افراد مبتلا به سرطان خون------------------- 81

فهرست شکلها

شکل 1-1: طرح مستر و جانسون از سیکل پاسخ جنسی انسان---------- 10

شکل 1-2: سلولهای سرطانی خون در مقایسه با سلولهای عادی---------- 30

شکل 1-3: انواع سلولهای خون-------------------------------- 31

شکل 1-4: شکل ظاهری زعفران مزروعی------------------------- 40

شکل 1-5: ساختمان شیمیاییکروسین، کروستین،

پیکروکروسین و سافرانال زعفران------------------------------ 42

شکل 1-6: کاربردهای سنتی رایج از گیاه زعفران-------------------- 45

شکل 3-1: عدم تشکیل باند ژن Int-2 در تعدادی از بیماران----------- 82

شکل 3-2: عدم تشدید ژن Int-2 نسبت به تک ژن-IFNγ در افراد شاهد- 82

شکل 3-3: مقایسه تشدید ژنی در ژن C-myc نسبت به تک ژن-IFNγ

در فرد مبتلا به سرطان خون و سالم----------------------------- 83

شکل 3-4: شدت تکثیر آنکوژن Int-2 قبل و پس

از مصرف زعفران در نمونه شاهد------------------------------ 84

شکل 3-5: شدت تکثیر آنکوژن Int-2 قبل و پس

از تاثیر زعفران در بیمار سرطانی------------------------------ 84

فهرست شکلها صفحه

شکل3-6: مقایسه تشکیل باند ژن Int-2 و -IFNγ

قبل و پس از تاثیر زعفران در بیمار سرطانی----------------------- 85

شکل3-7 : مقایسه تشکیل باند ژن Int-2 و -IFNγ قبل

و پس از مصرف زعفران در شرایط In vivo------------------------------- 85

شکل 3-8 : تشکیل باند ژن Int-2 و -IFNγ در پس از

مصرف زعفران در شرایط In vivo--------------------------------------- 86

شکل 3-9 : مقایسه تعداد سلولهای سرطانی و توده لنفوسیتی

در بیمار سرطانی با بزرگنمایی 5------------------------------- 87

شکل 3-10: مقایسه تعداد سلولهای سرطانی و توده لنفوسیتی

در بیمار سرطانی با بزرگنمایی 10------------------------------ 87

شکل 3-11: مقایسه تعداد سلولهای سرطانی و توده لنفوسیتی

در بیمار سرطانی با بزرگنمایی 40 ----------------------------- 87

 

 

فهرست نمودارها صفحه

نمودار 3-1: مقایسه میانگین غلطت هورمون LH--------------------------- 79

نمودار 3-2: مقایسه میانگین غلطت هورمون FSH------------------------- 79

نمودار 3-3: مقایسه میانگین غلطت هورمون استروژن---------------- 79

نمودار 3-4: مقایسه میانگین غلطت هورمون پرولاکتین---------------- 79

نمودار 3-5: مقایسه میانگین غلطت هورمون تستوسترون-------------- 79

نمودار 3-6: مقایسه میانگین غلطت هورمون پروژسترون--------------- 79

نمودار 3-7: مقایسه میانگین حجم مایع منی----------------------- 80

نمودار 3-8: مقایسه میانگین تحرک اسپرم------------------------- 80

نمودار 3-9: مقایسه میانگین تعداد اسپرم------------------------- 80

نمودار 3-10: مقایسه میانگین شکل طبیعی اسپرم------------------- 80

 

 

 

توجه داشته باشید: درصورتی که شما صاحب اثر این فایل می باشید یا به هر دلیلی نسبت به فایل تحقیقاتی مذکور در این پست مالکیت معنوی دارید و درخواست حذف آن را دارید، در واتس آپ به شماره 09100636002 پیام دهید تا ظرف 24 ساعت نسبت به حذف فایل از روی سایت دانشجوسرا اقدام شود. در صورت تمایل و درخواست، دو مقاله به صورت رایگان (به نام پژوهشگر و دانشجو) در مجلات علمی معتبر پذیرش شده و چاپ می گردد. ((حفظ حقوق معنوی صاحب اثر در اولویت فعالیت سایت دانشجوسرا می باشد))